Layton Kyouju to Eien no Utahime

Layton, Luke i Remi zostają wciągnięci w zagadkę śmierci i ponownego pojawienia się Meliny, przyjaciółki słynnej śpiewaczki operowej Jenis Quatlane. Melina, zmarła rok temu, powróciła jako siedmioletnia dziewczynka, twierdząc, że odkryła sekret nieśmiertelności i posiada wiedzę dostępną tylko prawdziwej Melinie. Sprawa prowadzi ich do opery Crown Petone, gdzie rozgrywa się przedstawienie o zaginionym Królestwie Nieśmiertelnych i jego królowej. Wkrótce po spektaklu pojawia się zamaskowany mężczyzna, proponując publiczności śmiertelną grę o nieśmiertelność. Layton i Luke muszą wkroczyć do gry, aby odkryć prawdę o wiecznym życiu i stawić czoła niebezpieczeństwu. Akcja rozgrywa się pomiędzy wydarzeniami z gier Professor Layton and the Last Specter i Professor Layton and the Miracle Mask.